加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

荧光定量PCR Mix(染料法)图片
产品货号:
BTN90408
中文名称:
荧光定量PCR Mix(染料法)
英文名称:
2×SYBR qPCR Mix
产品规格:
1mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及SYBR Green I等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应,具有广泛的用途。




  • 方便,用户只需准备模板和引物即可以进行实时定量PCR实验。
  • 产品为2×PCR反应预配液,操作步骤已经最大限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
  • 扩增效率和灵敏度更高。
  • 快捷,即用型的预配液使加样操作步骤简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
  • 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。



组分规格
2×SYBR qPCR Mix1mL
说明书1份

保存:-20℃,有效期1年。


  • 如果有N个样品(最好含一个样本制备阳性对照和一个样本制备阴性对照)并且做定量分析,最好设置N+7个反应,多出的7个中,6个用于6点标准曲线,一个是扩增阴性对照(NC)。在N+7个PCR管中,加入下列成分。如果是做定性分析,则6个做标准曲线的样品缩减成一个扩增阳性对照(PC),用户自己需要根据下表进行适当修改(把6个标曲反应改成1个阳性对照反应)。
    成分N个样品管6个标准曲线管NC管
    2×染料法qPCR MasterMix各10μL各10μL10μL
    自备引物1(10μM)各1μL各1μL1μL
    自备引物2(10μM)各1μL各1μL1μL
    模板DNA
    (自备)
    基因组DNA10~100ng不加不加
    cDNA1~10ng不加不加
    自备阳性对照模板(6各梯度)不加各1μL不加
    阴性对照模板(一般用水)不加不加1μL
    自备50×ROX I或ROX II染料各0.4μL各0.4μL0.4μL
    超纯水至20μL至20μL至20μL
  • 放入荧光PCR仪中进行扩增,下表的扩增参数仅供参考。
    步骤温度时间备注
    预变性95℃5分钟
    PCR反应
    (35-45循环)
    94℃10秒
    55~65℃15~30秒靶分子长度最好在80~200bp
    72℃40秒采集SYBR通道的荧光信号
    溶解曲线分析按qPCR仪器手册执行
  • 通过溶解曲线分析的结果排除无效数据。有Ct值,但Tm值跟扩增阳性对照Tm不一样的样品(包括对照和待测样品),归为假阳性,数据无效,不予以分析。Tm跟扩增阳性对照Tm一致的,为有效Ct。
  • 如果两种阴性对照(样本制备阴性对照和扩增阴性对照)的溶解曲线所得Tm值跟扩增阳性对照的Tm值一样,说明环境或试剂可能有过去的PCR扩增产物污染,则此次实验无效,需要解决污染问题再进行实验。
  • 如果两种阴性对照(样品制备阴性对照和PCR阴性对照)是假阳性,可以继续分析其它样品有效数据。
  • 对定量检测,以6个标准曲线样品的浓度的log值为横轴,以有效Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的有效Ct值从标准曲线上推算出样品DNA浓度的log值,再换算出待测样品的DNA浓度。
  • 对定性检测,则得到有效Ct值的样本为阳性,无有效Ct值的为阴性。



附录1:关于ROX使用
下列信息仅供参考,具体以qPCR仪器的使用手册为准。
  • 不需要ROX的机型:Agilent MX3000和MX4000、iCycler IQ、LightCycler 480、Smart Cycler System、Thermal Cycler Dice Real Time System等型号的荧光PCR仪器不需要加ROX染料,但加入的话也不会影响整个PCR分析。
  • 需要使用ROX I的机型:ABI Prism7000、7300、7700、7900HT、Step One、Step One Plus。
  • 需要使用ROX II的机型:ABI Prism7500、7500 Fast、MJ Opticon、MJ Chromo4、Corbett RotorGene 3000。

相关搜索:荧光定量PCR Mix(染料法)染料法qPCR Mix2×SYBR qPCR Mix
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3